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选择环境良好的芝地选择芝场时,要求前茬没栽培过食用菌,同一块芝地上下茬隔2年以上,不同年份的2块芝地之间相距100m以上。环境质量符合NY5010-2002标准。采取措施防止基质变质适宜菌丝生长的段木块含水量是33%~48%,若原木砍伐时间较长,可于截段前或截段后浸水5~24h或加大填充用木屑的含水量。装袋后要尽快码袋灭菌,冬季装袋后到灭菌开始的时间间隔也不宜超过2d。注意一次性灭菌数量不宜太多(10000袋以内为宜),以免造成灭菌不彻底、基质变质,延长灭菌、接种时间,增加菌袋感染率。使用高质量的塑料袋,减少微孔使用产品质量可靠、稳定的厂家生产的塑料袋,厚度要求0.035mm~0.05mm,装袋、灭菌、接种及运输过程中要轻拿轻放,发现被段木块刺破的菌袋,须用纸胶布或透明胶布粘住菌袋砂眼或微孔。



用750g、口径4cm的瓶,也可采用广口瓶或罐头瓶。拌料装瓶主料与辅料等先拌匀,把糖溶于水中而后逐渐加入料中并充分拌匀,每100kg干料加水140?160kg,以手紧握料指缝中有少量水滴下为宜。采用徒手或装瓶机分装,要求松紧适中,直至离瓶口1cm处,压平,中央用捣木打孔至瓶底,洗净瓶口、瓶壁污物,瓶口用牛皮纸包好。灭菌接种常压100兀灭菌,持续8?12h,高压灭菌121兀,保持1.5h。待冷却后,在无菌条件下接入菌种。然后放到培养室,控制温度25兀,室内相对湿度控制在70%以下。培养室内保持黑暗状态,以利菌丝生长。一般经20d发菌培养,当菌丝长至1/2瓶时,可以除去封口纸,搬至于实体发生室。此时控温25兀?28兀,相对湿度增至90%~95%,保持空气清新,增强漫射光。菌盖不断生长,直至四周白色生长圈消失,即停止生长扩大,但仍可继续加厚。子实体形成菌管,弹射出红褐色孢子。



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灵芝,始载于《神农本草经》,属于担子菌纲多孔菌科灵芝属的一种药用真菌植物.灵芝孢子是灵芝在成熟时从菌盖中弹射出来的极微小的孢子,具有较高的药用价值和药理活性,其药理作用主要为、免疫调节、抗氧化、神经保护、保肝和抗等.由于灵芝孢子具有双层细胞壁,其主要为几丁质、纤维素、木质素等,导致其细胞壁坚韧,不易破解,使其中的有效成分难以被人体吸收利用.对此,本研究主要综述了灵芝孢子的破壁方法及其药理作用,以期充分了解灵芝孢子的研究现状,为其进一步的研究、开发和利用提供一定的参考依据. 灵芝孢子破壁方法目前,国内外有关研究对灵芝孢子的破壁方法概括起来主要有5种,分别为生物法、化学法、物理法、机械法和综合法.生物法生物法的优点是基本不消耗能量,破碎效果较好,设备简单;缺点是需要的时间较长,并且难以去除残留的酶液或微生物等.孢子萌发法.孢子萌发法主要利用灵芝孢子自身的萌发能力破坏灵芝孢子细胞壁,释放胞内成分.将灵芝抱子和面粉等混合,在温度27?29°C、相对湿度75%?85%条件下发酵,结果显示,灵芝抱子萌发良好.



酶解法.酶解法通过利用几丁质酶、纤维素酶或溶壁酶等酶液的一种或多种,使灵芝抱子细胞壁中的成分降解,释放其有效成分.使用生物酶辅助提取灵芝酸A,终实现灵芝酸A的提取率达到0.54%. 溶菌法.利用微生物和灵芝抱子一同发酵,让微生物在发酵过程中降解灵芝抱子细胞壁.利用益生菌枯草芽抱杆菌、嗜酸乳杆菌与灵芝抱子进行液态发酵,终使得灵芝抱子破壁率达到85%以上.化学法化学法的优点与生物法较为相似;缺点是提取溶剂易导致有效成分变性,且溶剂残留不易去除.溶剂提取法.溶剂提取法利用“相似相溶”原理,使灵芝抱子在水、乙醇等溶剂中长时间浸泡或回流,从而使有效成分扩散到溶剂中.例如,Lee等8采用25%乙醇提取灵芝中的成分,终减压浓缩并定容至500mL保存,通过灵芝的25%乙醇提取物,研究其通过Nrf2/HO-1通路增强细胞的抗氧化作用,该方法对灵芝孢子的提取率较好.

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